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谷胱gan肽檢測探針細胞染色

谷胱gan肽檢測探針細胞染色

簡要描述:

谷胱gan肽檢測探針細胞染色還原型谷胱gan肽(GSH)的亞細胞檢測和定位對于了解氧化還原態(tài)的調(diào)節(jié)、藥物的作用效應(yīng)以及脫毒機制方面十分重要

產(chǎn)品時間:2026-04-16

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ThiolTrace Violet 500 (glutathione detection reagent)

谷胱gan肽檢測探針


產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號

規(guī)格        

價格(元)

ThiolTrace Violet 500 谷胱gan肽檢測探針

MX5322-100T

100T

1486

ThiolTrace Violet 500 谷胱gan肽檢測探針

MX5322-500T

500T

3586


產(chǎn)品描述

還原型谷胱gan肽(GSH)的亞細胞檢測和定位對于了解氧化還原態(tài)的調(diào)節(jié)、藥物的作用效應(yīng)以及脫毒機制方面十分重要。有文獻報道不同細胞亞群在應(yīng)對氧化應(yīng)激時的GSH水平存在差異,因此,適用于流式細胞分析和自動化熒光檢測的GSH檢測探針的開發(fā)非常重要。比較于常用的GSH檢測探針:單溴二胺(mBBr,MX5315)、單氯二胺(mBCl,MX5318),以及Thiotracker™ Violet,ThiolTrace™ Violet 500是一款更明亮和更穩(wěn)定的細胞內(nèi)硫醇探針(Thiol probe),用于監(jiān)測胞內(nèi)硫醇。由于GSH代表細胞內(nèi)的絕大多數(shù)游離硫醇,因此,ThiolTrace™ Violet 500能用來評估細胞內(nèi)GSH的水平。


ThiolTrace™ Violet 500具有以下優(yōu)勢:

j 比mBCl和其他常用的胞內(nèi)硫醇染料(比如:Thiotracker Violet)至少明亮10×;在含生長因子的細胞培養(yǎng)基內(nèi),ThiolTrace Violet 500比Thiotracker Violet的熒光強度高10-100倍(見附圖I)。

k 能用紫外(UV)或405nm波長激發(fā),最大發(fā)射波長~525nm(見附圖II)。

l 能用醛類固定和0.5% Triton X-100透化。

m 能用于多通路分析,包括細胞毒性研究。

n 兼容于各種稀釋溶液包括含血清的細胞培養(yǎng)基。

o 操作簡單,只需37℃孵育30min即可進入細胞內(nèi);

p 適用于多種檢測方法,包括:流式細胞術(shù)、HCS成像和落射熒光顯微鏡。


本品以溶于500×的DMSO儲存液形式提供。以MX5322-100T包裝為例,用于熒光顯微鏡檢測,按照200μl工作液/孔,可以做100個孔。用于流式分析,按照500μl/次,可以做40次。


保存與運輸方法

保存:≤-20℃避光干燥保存,6個月有效。

運輸:冰袋運輸。


注意事項

1)   整個染色過程中需注意避光。

2)   ThiolTrace™ Violet 500(500× in DMSO)在4℃,冰浴等較低溫度下會凝固而粘附在離心管官底、管壁或管蓋內(nèi),可將置于25℃水浴溫育片刻直至全部融解后使用。對于微量液體,每次使用前低速離心使得液體全部沉降至管底,再開蓋使用。

3)   為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


產(chǎn)品使用

一、試劑準備

j 于實驗前,將低溫保存的500×儲存液置于室溫回溫至少20min使其完quan融化。

k低速離心3~5min,使其完quan沉淀置管底。

l于超凈臺內(nèi)開蓋取用。初次使用,需根據(jù)單次用量分裝,置于-20℃避光密封干燥保存,避免反復(fù)凍融。


二、工作液準備

于實驗前,取1μl ThiolTrace Violet 500儲存液(500×)加入500μl生理緩沖液(比如:HBSS、HHBS),充分混勻,即得到所需的染色工作液,染色工作液現(xiàn)配現(xiàn)用;

【注】:也可以用不含血清的細胞培養(yǎng)基來配制染色工作液。


三、操作流程(96孔板熒光成像,黑框透明底板)

3.1 如有需要,用待測化合物處理細胞(細胞密度:5×105~1×106細胞/孔)一段時間,去除培養(yǎng)基。

【注】:適宜的處理時間因細胞類型和細胞密度的不同而有差異,每次實驗都推薦優(yōu)化處理時間。


四、操作流程(流式分析)

4.1 如有需要,用待測化合物處理細胞(細胞密度:5×105~1×106細胞/孔)一段時間。

【注j】:適宜的處理時間因細胞類型和細胞密度的不同而有差異,每次實驗都推薦優(yōu)化處理時間。

【注k】:對于貼壁細胞,用0.5mM EDTA處理細胞使其漂浮以維持細胞完整,染色前用含血清的培養(yǎng)基清洗細胞一次。


相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格        

MX5322-100T

ThiolTrace Violet 500 (glutathione detection reagent)谷胱gan肽檢測探針

100T

MX5315-10MG

Monobromobimane (mBBr) (Thiol-reactive dye)單溴二胺(硫醇反應(yīng)性染料)

10mg

MX5316-25MG

ABD-F (Thiol Dye)硫醇標記染料

25mg

MX5317-25MG

Fluorescein-5-maleimide (Thiol Dye)熒光素-5-馬來酰亞胺(硫醇標記染料)

25mg

MX5318-10MG

Monochlorobimane (mBCl) (Thiol Dye)單氯二胺

10mg


附圖I. ThiolTrace Violet 500與Thiotracker Violet的染色效果圖


圖1. 含細胞培養(yǎng)基的Jurkat細胞分別用ThiolTrace Violet 500與Thiotracker Violet標記。染色流程:Jurkat細胞于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中用ThiolTrace Violet 500與Thiotracker Violet孵育20min。用流式細胞儀(Pacific Orange通道)測定熒光值。


附圖II. ThiolTrace Violet 500的光譜圖



— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】



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